【貨號(hào)】 BC-CL01

【規(guī)格】 1ml/1.5ml

【保存】 ?2-8℃，12個(gè)月

【類(lèi)型】 ?陽(yáng)離子聚合物

【產(chǎn)品介紹】

BC Trans-DNA plus是一款專(zhuān)為難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞設(shè)計(jì)的DNA轉(zhuǎn)染試劑，它能夠高效地傳送質(zhì)粒DNA。相較于其他轉(zhuǎn)染試劑，BC Trans-DNA plus擁有卓越的DNA轉(zhuǎn)染能力，其優(yōu)勢(shì)在于高轉(zhuǎn)染效率、血清干擾小、低毒性、良好穩(wěn)定性、操作簡(jiǎn)便以及出色的可重復(fù)性。

【應(yīng)用范圍】

BC Trans-DNA plus轉(zhuǎn)染試劑表現(xiàn)出廣泛的適用性，能夠高效應(yīng)對(duì)多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株的DNA轉(zhuǎn)染需求，無(wú)論是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染還是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。特別值得一提的是，該試劑在多種貼壁細(xì)胞系中表現(xiàn)出色，尤其對(duì)于BMDC、4T1、CT26、DC2.4等難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型，依然能夠?qū)崿F(xiàn)高轉(zhuǎn)染效率，并且具備良好的重復(fù)性。

【質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染步驟】

請(qǐng)確保所有操作都在無(wú)菌條件下進(jìn)行，并遵循實(shí)驗(yàn)室的安全規(guī)范。

以24孔板為例，請(qǐng)參考表1的轉(zhuǎn)染規(guī)模調(diào)整，步驟如下:

1. 細(xì)胞接種：在細(xì)胞培養(yǎng)板中，每孔接種0.5~1.0×105個(gè)細(xì)胞。將細(xì)胞在適宜條件下培養(yǎng)12~24小時(shí)，以確保在轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度達(dá)到約60~70%的融合度。

2. DNA稀釋?zhuān)簩⑺璧馁|(zhì)粒DNA用Opti-MEM培養(yǎng)基稀釋?zhuān)蛊浣K濃度達(dá)到0.1mg/mL。

3. 復(fù)合物制備：

（1）取1μL的BC Trans-DNA plus試劑原液，加入9μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。

（2）同時(shí)，取4μL濃度為0.1mg/mL的質(zhì)粒DNA，加入6μL的Opti-MEM培養(yǎng)基中。

（3）將上述兩者等體積混合，以形成轉(zhuǎn)染復(fù)合物。

（4）室溫靜置：讓轉(zhuǎn)染復(fù)合物在室溫下靜置10分鐘，以確保其充分結(jié)合。

4. 轉(zhuǎn)染細(xì)胞：將20μL的轉(zhuǎn)染復(fù)合物均勻加入到細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中，并輕輕混勻。

5. 培養(yǎng)與檢測(cè)：將細(xì)胞在37℃下繼續(xù)培養(yǎng)18~48小時(shí)。在此期間，無(wú)需更換培養(yǎng)基。

【質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)染優(yōu)化】

可通過(guò)改變細(xì)胞密度、 DNA濃度以及BC Trans-DNA plus濃度對(duì)轉(zhuǎn)染進(jìn)行優(yōu)化。保證細(xì)胞融合度在60%以上，BC Trans-DNA plus (μL):DNA (μg)可以在2:1和5:1之間調(diào)整。

表1. ?不同培養(yǎng)板所需轉(zhuǎn)染試劑和DNA的用量

培養(yǎng)板		接種 培養(yǎng)基	Opti-MEM稀 釋后終體積	DNA轉(zhuǎn)染
				試劑用量	DNA
96孔板	0.3cm2	200μL	10μL	0.5μL	0.2μg
24孔板	2.0cm2	500μL	20μL	1μL	0.4μg
12孔板	4.0cm2	1mL	40μL	2.5μL	1μg
6孔板	10.0cm2	2mL	100μL	5μL	2μg
60mm	20.0cm2	5mL	0.2mL	10μL	4.0μg
10cm	60.0cm2	15mL	0.6mL	30μL	12μg